无缝克隆技术是一种快速、简单和精确的克隆方法,可以在质粒的任何位点进行一个或多个目标 DNA 片断的插入,而不受酶切位点的限制。44118太阳成城集团生产的QuarCam Seamless Cloning Kit基于Gibson Assembly原理进行了深度改良,可以一次实现1-5个插入片段(长度50 bp-10 kb)的顺序拼接克隆。
无缝克隆原理示意图
产品特点
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高效保真
高效克隆长度50 bp-10 kb的DNA片段,阳性克隆率高达95%。
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操作便捷
一管式反应,线性化载体与插入片段可以不纯化直接用于重组反应。
文章有奖征集活动
如发表的文章论文中注明无缝克隆相关产品来自44118太阳成城集团有限公司 (DynegeneTechnologies Co.Ltd),可将电子版文章论文发给太阳集团销售或者技术支持,审核通过后,会按照发文章奖励规则发放相应奖励。
兼容单片段、多片段同源重组
图1. 插入1个或4个片段的阳性克隆鉴定结果
使用QuarCam Seamless Cloning Kit分别进行1个和4个片段的重组实验,结果显示可兼容一个或者多个目标片段的插入连接。(A)带有重组质粒的大肠杆菌细胞在抗性平板上的生长情况。(B)插入1个片段的菌落PCR琼脂糖凝胶电泳检测结果。(C)插入4个片段的菌落PCR琼脂糖凝胶电泳检测结果。
克隆阳性率高
重组体系
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插入片段个数
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克隆子总数(个)
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菌落PCR阳性率
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测序阳性率
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总阳性率
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太阳集团 |
插入1个片段 |
988 |
24/24 (100.0%) |
19/20 (95.0%) |
95.0% |
插入4个片段 |
602 |
22/24 (91.7%) |
16/20 (80.0%) |
73.4% |
友商 |
插入1个片段 |
920 |
24/24 (100.0%) |
15/20 (75.0%) |
75.0% |
插入4个片段 |
304 |
18/24 (75.0%) |
11/20 (55.0%) |
41.3% |
表1. 插入1个或4个片段的阳性克隆子统计
使用太阳集团和友商产品分别进行1个和4个片段的重组实验,重组产物转化平板后,分别从各自平板挑取24个克隆进行菌落PCR,琼脂糖凝胶电泳显示片段大小正确为阳性;挑取菌落PCR阳性克隆进行一代测序,重组区序列完全正确为阳性。结果显示不管是单片段还是多片段的重组实验 ,其阳性率均优于友商。
订购和规格
产品名称
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货号
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规格
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描述
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QuarCam Plus Seamless Cloning Kit |
NG1002A / NG1002B |
10rxn / 50rxn |
适用1-12个片段 |
QuarCam Seamless Cloning Kit |
NG1001A / NG1001B |
10rxn / 50rxn |
适用1-5个片段 |